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武汉百意欣生物技术有限公司是在武汉东湖新技术开发区成立的一家高新技术企业。该企业致力于研发具有自主知识产权的国际领先的癌症检测试剂和抗体,百意欣自成立以来,建立起客户客户订购肽和批量筛选肽的合成及修饰、订 ... [详细介绍]

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武汉百意欣cAMP/cGMP药物筛选试剂盒正式上市

发布时间:2017-08-16 09:15 点击次数:

cAMP和cGMP都是小分子的环状核苷酸,以微量存在于动植物细胞和微生物中,被称其为细胞内的第二信使(激素为第一信使)。
cAMP(或cGMP)由腺苷酸(或鸟苷酸)环化酶产生,被磷酸二酯酶降解,因此激活腺苷酸(或鸟苷酸)环化酶或者抑制磷酸二酯酶,可以提高细胞内cAMP(或cGMP)的含量。研究发现,cAMP(或cGMP)特异性磷酸二酯酶的抑制剂可用于人类疾病的治疗。如:增强β肾上腺素能受体(cAMP的封闭剂)已被用于心率失调、高血压、心肌梗死等心脏疾病;cAMP特异性磷酸二酯酶2/4的抑制剂正在进行认知增强方面的临床测试;而cGMP特异性磷酸二酯酶类型5可用于治疗ED等疾病。
在五十年的研究历程中,从开始研究cAMP,cGMP在各种生理过程中的调节作用,到近几年与之相关的药物研发,药物筛选领域,人们一直在努力寻找一种快速、灵敏、特异性和可重复地定量检测cAMP和cGMP含量的方法。
cAMP,cGMP分子量分别只有329.21和345.21,在机体内的含量极低,为pmol/L级别,用一般的分析方法无法测定。70年代一系列测定cAMP和cGMP的方法被发明出来,最基本的原理有三种:分别是竞争性蛋白质结合分析法、放射性免疫分析法和薄层色谱法。
本试剂盒利用竞争酶联免疫分析方法来测定细胞提取物或体外腺苷酸环化酶实验中的cAMP的水平。包被羊抗鼠多克隆抗体在酶标板上,细胞提取物或体外腺苷酸环化酶实验中的cAMP与固定数量的标记辣根过氧化物酶的cAMP竞争性的结合抗cAMP单克隆抗体,采用已知浓度的cAMP标准品来做标准曲线。检测450nm波长下的OD值,吸光度OD值与样品中cAMP的浓度呈反比关系。基于cAMP标准品所得曲线,通过测得的OD值可以计算出样品中cAMP的浓度,本试剂盒IC50(50% B/B0)约12pmol/mL,检测限约0.15 pmol/mL。